姜黄素对高糖诱导的大鼠视网膜血管内皮细胞凋亡的影响

作     者：黄江 李翊 肖建江 徐国旭 卜曙 罗蔚锋 Huang Jiang;Li Yi;Xiao Jianjiang;Xu Guoxu;Bu Shuyang;Luo Weifeng

作者机构：苏州大学附属第二医院眼科215004 复旦大学附属华山医院眼科上海200040 苏州大学附属第二医院神经内科215004 

出 版 物：《中华眼底病杂志》 (Chinese Journal of Ocular Fundus Diseases)

年 卷 期：2017年第33卷第5期

页      面：513-517页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：苏州市“科教兴卫”青年科技项目(KJXW2014014) 苏州市科技发展计划指导项目(SYSD2016091) 苏州大学附属第二医院临床优势科学群项目(XKQ2015002) 

主　　题：姜黄素 视网膜血管/细胞学 内皮细胞 细胞凋亡 NF—κB 

摘      要：目的观察姜黄素对高糖诱导的大鼠视网膜血管内皮细胞（RRVEC）凋亡的影响。方法取对数生长期原代培养的第4代RRVEC进行实验，采用免疫荧光染色法鉴定培养的细胞，并对内皮细胞的特异性标志物血管性假性血友病因子（vWF）的表达进行检测。将培养的RRVEC分为对照组、高糖组和姜黄素干预组。对照组细胞正常培养。高糖组细胞经30mmol／L的葡萄糖培养。姜黄素干预组细胞经30mmol／L的葡萄糖培养24h后，再加入30μmol／L姜黄素处理24h。采用流式细胞仪检测各组细胞内活性氧（ROS）相对含量及细胞凋亡的变化情况。采用免疫细胞化学染色法检测各组细胞中核因子（NF）．rd3p65的蛋白表达。采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤／白血病．2（Bcl-2）、Bcl-2相关x蛋白（Bax）的蛋白表达。结果分离得到的RRVEC在1周后呈铺路石样单层贴壁生长。培养获得的细胞vWF表达呈强阳性。对照组、高糖组及姜黄素干预组RRVEC中ROS相对含量、细胞凋亡率比较，差异有统计学意义（F=40．957、325．137，P=0．000、0．000）。与对照组比较，高糖组RRVEC中ROS相对含量、细胞凋亡率明显增加，差异有统计学意义（t=8．677、25．500，P=0．000、0．000）。与高糖组比较，姜黄素干预组RRVEC中ROS相对含量、细胞凋亡率明显降低，差异有统计学意义（t=6．568、12．818，P=0．000、0．000）。与对照组比较，高糖组RRVEC中NF．r,Bp65（t=8．322，P=0．000）、Bax（t=3．813，P=0．009）蛋白表达明显增加，Bc1-2蛋白表达（t=4．362，P=0．005）及Bcl-2／Bax值（t=6．449，P=-0．001）明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。与高糖组比较，姜黄素干预组RRVEC中NF．1cBp65、Bax（f=2．577、3．059，P=-0．042、0．022）蛋白表达明显降低，Bcl-2／Bax比值（t=3．831，P=0．009）明显提高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论姜黄素能抑制高糖诱导的RRVEC凋亡，其机制可能与增强Bc1-2表达、下调Bax表达从而抑制NF．心信号通路有关。