阿尔茨海默病pcDNA3.1/APP595/596质粒的构建研究
Construction of human Alzheimer's disease' APP-expressing Plasmid作者机构：中南大学湘雅医院神经内科湖南长沙410008
出 版 物：《中国现代医学杂志》 (China Journal of Modern Medicine)
年 卷 期：2010年第20卷第14期
页 面：2146-2149页
学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学]
主 题：阿尔茨海默病 pcDNA3.1/APP595/596质粒 淀粉样前体蛋白
摘 要：目的构建人类阿尔茨海默病淀粉样前体蛋白(APP)真核表达质粒,为深入研究该病发病机制提供基础。方法从原始质粒克隆模板中,利用PCR方法扩增目的基因APP695cDNA,将目的基因和目的载体pcDNA3.1分别酶切;纯化酶切产物后定向连接,并将其转化细菌感受态细胞,对生长出的克隆行PCR鉴定,PCR鉴定为阳性的克隆送测序并行比对分析。结果应用DNAStar软件对阳性克隆测序结果与GenBank中APP基因序列比对,证实原序列中的错义突变G已被突变回C,第4位点碱基定点突变完成。结论成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1/APP595/596,为建立阿尔茨海默病转基因细胞模型奠定基础。
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