近红外成像用于双向电泳前的蛋白质快速定量

作     者：刘云 曹嵩 李科 李三华 宋长伟 覃成 朱欣婷 LIU Yun;CAO Song;LI Ke;LI San-hua;SONG Chang-wei;QIN Cheng;ZHU Xin-ting

作者机构：遵义医学院贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治重点实验室贵州遵义563000 贵州省麻醉与器官保护基础研究重点实验室贵州遵义563000 遵义医学院附属口腔医院贵州遵义563000 遵义医学院基础医学院贵州遵义563000 

出 版 物：《分析科学学报》 (Journal of Analytical Science)

年 卷 期：2017年第33卷第4期

页      面：541-544页

核心收录：

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基　　金：贵州省科技厅社会发展攻关项目(黔科合SY字3031) 遵义医学院招标项目(F-614) 贵州省科技厅 遵义市科技局 遵义医学院联合基金(黔科合J字LKZ31号) 贵州省教育厅特色重点实验室建设项目(黔教合KY字212) 

主　　题：蛋白质定量 近红外成像 考马斯亮蓝 双向电泳 

摘      要：双向电泳(Two-dimensional Electrophoresis,2D)是蛋白质组学研究过程中的常用技术,而蛋白质样品的准确定量是做好双向电泳的前提条件。由于双向电泳的蛋白质样品在定量时存在试剂兼容性的问题,故需使用GE或Bio-rad公司研发的双向电泳专用蛋白质定量试剂盒,但此类试剂盒价格高昂且操作繁琐,因此亟待开发一种快速、准确、成本低廉的蛋白质定量方法。通过研究发现,蛋白质溶液与考马斯亮蓝-G250混合后,在近红外荧光成像系统680nm波长下可以被激发出荧光,且当蛋白质浓度在0.01~0.2mg·mL^(-1)范围内时,其荧光强度与蛋白质浓度具有很好的线性关系。基于此特点,建立了一种以96孔板为载体,利用近红外成像技术对蛋白质样品进行定量的方法,该方法可用于双向电泳前蛋白质样品的快速定量。