靶向抑制有丝分裂驱动蛋白治疗多西紫杉醇耐药前列腺癌的体外疗效

作     者：董伟 邢乃栋 吕家驹 刘帅 孙亮 曹庆伟 董宇昊 刘钊 丁森泰 DONG Wei;XING Naidong;L(U) Jiaju;LIU Shuai;SUN Liang;CAO Qingwei;DONG Yuhao;LIU Zhao;DING Sentai

作者机构：山东大学附属省立医院泌尿外科山东济南250021 山东大学齐鲁医院泌尿外科山东济南250012 

出 版 物：《山东大学学报（医学版）》 (Journal of Shandong University:Health Sciences)

年 卷 期：2017年第55卷第9期

页      面：23-30页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81202017) 山东省重点研发计划(2016GSF201147) 济南市科技发展计划(201121060) 

主　　题：有丝分裂驱动蛋白 多西紫杉醇耐药 前列腺肿瘤 靶向治疗 

摘      要：目的探讨甲氧基-(S)-三苯甲基-L-半胱氨酸[S(MeO)TLC]靶向抑制有丝分裂驱动蛋白(KSP)在体外试验中对多西紫杉醇耐药前列腺癌的治疗效果。方法培养建立多西紫杉醇耐药前列腺癌细胞株(PC3R),Western blotting检测不同细胞株(PC3、DU145及PC3R)KSP蛋白表达水平;实验分空白对照组、PC3R组及PC3组,MTT及台盼兰染色细胞活性实验观察S(MeO)TLC抑制耐药细胞增殖效果;以耐药细胞株PC3R为研究对象,实验分为S(MeO)TLC组及对照组,Heochst染色、流式细胞仪及RT-PCR技术检测S(MeO)TLC诱导耐药细胞凋亡的效果。结果PC3、DU145、PC3R细胞KSP蛋白表达量差异无统计学意义(P0.05)。PC3R细胞S(MeO)TLC半数抑制浓度(IC50)为120 nmol/L,与PC3细胞(IC50:106 nmol/L)比较,差异无统计学意义(P0.05)。PC3R细胞给予S(MeO)TLC作用24 h后,87.9%细胞停滞在有丝分裂期;给药72 h后,有丝分裂期停滞细胞显著凋亡。与对照组相比,S(MeO)TLC组PC3R细胞Caspase-3(t=13.445,P=0.000 2)、Caspase-8(t=9.494,P=0.000 7)、Caspase-9(t=5.198,P=0.007)、PARP(t=19.097,P=0.000 04)及自噬标志指标LC3(t=22.609,P=0.000 02)和Beclin1(t=61.266,P=0.000 000 4)的mRNA量均明显升高。结论前列腺癌多西紫杉醇耐药与KSP蛋白表达无关,KSP蛋白靶向抑制剂S(MeO)TLC能够有效抑制多西紫杉醇耐药前列腺癌细胞增殖并诱导其凋亡。在此过程中,内源性和外源性Caspase依赖性的凋亡途径均发挥了重要作用,且自噬可能发挥协同作用。