高迁移率蛋白B1对血管平滑肌细胞迁移的影响及分子机制研究

作     者：杨简 范致星 李馨欣 彭家芹 姜玉蓉 陈勇 Yang Jian;Fan Zhixing;Li Xinxin;Peng Jiaqin;Jiang Yurong;Chen Yong

作者机构：三峡大学第一临床医学院心内科湖北宜昌443003 

出 版 物：《重庆医学》 (Chongqing medicine)

年 卷 期：2015年第44卷第4期

页      面：439-441,445页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81200088) 宜昌市科技研究与开发项目(A12301-01) 

主　　题：Toll样受体4 高迁移率蛋白B1 PI3K/Akt信号通路 血管平滑肌细胞 

摘      要：目的探讨高迁移率蛋白B1（HMGB1）对血管平滑肌细胞（VSMCs）迁移的影响及TLR4依赖的TLR4/PI3K/Akt信号通路介导的分子机制。方法体外分离培养大鼠胸主动脉VSMCs,采用不同浓度HMGB1（0.1-1 000.0ng/mL）处理,分为对照组（未经任何处理）、HMGB1组、HMGB1＋TLR4siRNA转染组、Control siRNA转染组和磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）抑制剂（LY294002）干预组,观察各组细胞活性及HMGB1对VSMCs迁移的影响;实时定量RT-PCR与Western blot分别检测TLR4、Akt、p-Akt、PI3K mRNA和蛋白的表达;ELISA测定PI3K的活性。结果 HMGB1（0.1-1 000.0ng/mL）呈剂量依赖性促进VSMCs迁移（P〈0.05）;经细胞活性测定,HMGB1在使用的浓度范围内对VSMCs未造成细胞毒性作用（P〈0.05）;HMGB1（100ng/mL）处理的VSMCs细胞组PI3K活性及Akt磷酸化水平明显增加（P〈0.05）;经TLR4siRNA转染发现,HMGB1引起的VSMCs迁移明显减弱（P〈0.05）,同样在PI3k抑制剂干预组,PI3K/Akt途径活化和HMGB1介导的VSMCs迁移也被明显抑制（P〈0.05）。结论 HMGB1呈剂量依赖性促进VSMCs迁移,TLR4依赖的TLR4/PI3K/Akt信号通路参与了此过程,提示以TLR4依赖的PI3K/Akt途径为靶点,可为阻塞性血管疾病的治疗提供新思路。