牛传染性鼻气管炎病毒gC蛋白单克隆抗体的制备与初步应用

作     者：马辉 边传周 王永芬 王鲜萍 郑宝亮 赵绪永 MA Hui;BIAN Chuan-zhou;WANG Yong-fen;WANG Xian-ping;ZHENG Bao-liang;ZHAO Xu-yong

作者机构：郑州牧业工程高等专科学校生物工程系郑州450011 河南大学生命科学学院开封475001 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2013年第44卷第10期

页      面：1637-1644页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：河南省重点科技攻关项目(092102110073) 

主　　题：牛传染性鼻气管炎病毒 gC蛋白 单克隆抗体 ELISA 

摘      要：为制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gC蛋白的特异性单克隆抗体,并分析其免疫学特性,以原核表达并纯化的重组gC蛋白为免疫原注射免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合。建立间接ELISA方法筛选分泌gC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,获得1株能稳定分泌gC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3D6。3D6的亚类为IgG1型,轻链为κ链;上清、腹水抗体效价分别为6.4×103、1.28×105;Western blot和间接免疫荧光试验表明该单克隆抗体能识别牛gC蛋白。利用3D6细胞株分泌的单克隆抗体建立了检测IBRV的双抗体夹心ELISA方法,结果证明,该方法特异性和敏感性良好,为快速诊断IBRV和研究gC蛋白功能奠定了基础。