通心络通过PI-3K/Akt/HIF信号通路改善血管内皮细胞缺氧损伤

作     者：梁俊清 徐海波 陈小娟 邢志军 尹蓓珮 吴琨 张梓倩 周丽涛 吴以岭 LIANG Jun-qing;XU Hai-bo;CHEN Xiao-juan;XING Zhi-jun;YIN Bei-pei;WU Kun;ZHANG Zi-qian;ZHOU Li-tao;WU Yi-ling

作者机构：河北以岭医药研究院河北石家庄050035 承德医学院附属医院河北承德067000 上海医药工业研究院上海200040 第二军医大学附属东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心上海200438 

出 版 物：《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期：2012年第28卷第5期

页      面：846-851页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(国家973计划)项目(No.2012CB518606 No.2005CB523300) 国家自然科学基金青年基金资助项目(No.81102768) 十二五科技重大专项重大新药创制课题(No.2011ZX0940-020) 

主　　题：通心络 缺氧诱导因子 血管内皮细胞 信号转导 缺氧损伤 

摘      要：目的:观察通心络对缺氧血管内皮细胞中缺氧诱导因子(HIF)及其上游信号转导通路PI-3K/Akt的影响,探讨PI-3K/Akt/HIF信号通路在通心络改善血管内皮细胞抗缺氧损伤中的作用。方法:将体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)分为常氧对照组、通心络组、缺氧组和缺氧+通心络组。采用CCK-8试剂盒检测各组细胞的活性,Western blotting检测HIF-1α、Bcl-2、Mcl-1、Bax表达变化及Akt的磷酸化情况。利用HIF-1α的显性负性突变体(DN-HIF)瞬时转染HUVECs,流式细胞仪分析细胞的凋亡情况。利用PI-3K和Akt的显性负性突变体瞬时转染HUVECs,探讨PI-3K/Akt信号通路在通心络改善血管内皮细胞抗缺氧损伤中的作用。结果:与常氧条件下比较,通心络对缺氧内皮细胞虽有明显的促增殖作用,但程度明显减弱。通心络可显著上调HIF-1α、Bcl-2、Mcl-1蛋白表达水平及Akt磷酸化水平,且下调Bax的表达。利用DN-HIF抑制HIF-1α的活化后,通心络提高缺氧HUVECs活性的程度明显下降,但仍可一定程度上降低细胞凋亡百分率。进一步利用PI-3K显性负性突变体(Δp85)和Akt显性负性突变体(DN-Akt)阻断HIF-1α上游信号通路PI-3K/Akt后,通心络上调缺氧HUVECs HIF-1α蛋白表达的作用明显减弱,促进Akt磷酸化的作用基本消失。结论:在缺氧条件下,通心络上调HUVECs HIF-1α蛋白表达水平,促进抗凋亡因子同时抑制促凋亡因子的表达,降低细胞凋亡率,从而提高缺氧细胞的增殖率,这些作用在一定程度上依赖于PI-3K/Akt/HIF通路的活性。