人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养:组织块法的优化

作     者：金宇林 吴洁莹 陆琰 陈劲松 李发涛 唐婕 刘东 梁绮华 李焱 汤雪薇 谢闺娥 吴韶清 Jin Yu-lin;Wu Jie-ying;Lu Yan;Chen Jin-song;Li Fa-tao;Tang Jie;Liu Dong;Liang Qi-hua;Li Yan;Tang Xue-wei;Xie Gui-e;Wu Shao-qing

作者机构：广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心广东省广州市510623 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2017年第21卷第21期

页      面：3388-3393页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 0710[理学-生物学] 0403[教育学-体育学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 071007[理学-遗传学] 0703[理学-化学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81102248) 广东省医学科研基金(B2010274) 广东省科技计划项目(2014A020 212027) 广州市妇女儿童医疗中心儿科研究所基金(YIP-2016-014)~~ 

主　　题：胎盘 绒毛膜 间质干细胞 细胞培养技术 组织工程 干细胞 培养 间充质干细胞 细胞培养 组织块法 优化 匀浆器 国家自然科学基金 

摘      要：背景:关于人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养方法的研究很多,但是如何简便、快捷获得大量原代培养间充质干细胞的问题尚未解决。目的:探讨优化人胎盘绒毛膜间充质干细胞体外分离培养组织块法的最佳方法。方法:无菌条件下,取正常足月剖宫产胎盘绒毛膜,用匀浆器处理组织块,采用组织块法贴壁分离培养人胎盘绒毛膜间充质干细胞,经初次培养的组织块进行再次接种培养。结果与结论:用电动匀浆器处理人胎盘绒毛膜省时省力,组织分散度和去除红细胞效果好。初次培养和再次培养获得细胞的平均时间分别为(17.73±1.14)d和(10.03±1.30)d。每个Φ100 mm培养皿获得的原代细胞分别为(6.97±0.98)×10~5个和(13.82±1.44)×10~5个。获得的贴壁细胞呈典型的成纤维细胞形态,呈平行或漩涡状生长,高表达CD90、CD73、CD105,而CD45、CD34、CD14、CD19、HLA-DR为阴性。细胞可向成骨、成脂方向诱导分化。结果表明优化的方法能够简便、快捷地处理人胎盘绒毛膜组织,获得大量的原代间充质干细胞。