六重荧光RT-PCR快速检测A、B型流感等呼吸道病毒方法的建立
Establishment of a method for rapid detection of respiratory viruses such as influenza A and B by sextuple fluorescent real-time RT-PCR作者机构：深圳市龙岗区坪地预防保健所广东深圳518117 深圳市疾病预防控制中心广东深圳518055 深圳市慢性病防治中心广东深圳518000
出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)
年 卷 期：2017年第17卷第7期
页 面：872-876页
学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学]
主 题：流感病毒A 流感病毒B 偏肺病毒 冠状病毒NL63 冠状病毒HKU1 冠状病毒OC43 六重荧光RT-PCR
摘 要：目的利用六重荧光RT-PCR法建立起一种快速检测A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒的方法。方法根据A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒的保守序列,设计相应的引物和Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒优化反应体系后,采用十倍稀释体外转录RNA检验建立体系的灵敏度和重复性,并建立相对定量的标准曲线;利用具有多种相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性。结果 A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒的检测灵敏度为100 copies/μL,标准曲线的相关系数都在99%以上,重复性良好,特异性实验未发现有非特异性扩增。结论本研究建立的六重荧光RT-PCR技术可以快速、准确地检测A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒等六种呼吸道病毒。
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