椎间盘髓核细胞应力模型中Piezo1蛋白的表达

作     者：王天宝 李晓飞 冷萍 马佳超 张海宁 WANG Tianbao;LI Xiaofei;LENG Ping;MA Jiachao;ZHANG Haining

作者机构：青岛大学附属医院关节外科山东青岛266003 青岛大学附属医院药剂科山东青岛266003 

出 版 物：《青岛大学医学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Qingdao Universitatis)

年 卷 期：2017年第53卷第3期

页      面：257-260页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主　　题：机械激活性离子通道 椎间盘移位 椎间盘髓核细胞 

摘      要：目的探讨新型机械激活性离子通道Piezo1蛋白在人椎间盘髓核细胞应力模型中的表达。方法将人椎间盘髓核细胞分成牵张应力组和牵张应力+Piezo1蛋白抑制剂组,构建人椎间盘髓核细胞体外培养-应力刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统FX-4000T处理髓核细胞,两组均加载0、2、12、24、48h的周期性牵张应力。采用RT-PCR、Western-blot技术检测两组Piezo1的表达水平,应用激光共聚焦显微镜检测Piezo1蛋白荧光的强弱。结果 RT-PCR结果显示,牵张应力组给予2h周期性牵张应力时,Piezo1 mRNA表达较给予0h周期性牵张应力时增加,给予24h周期性牵张应力时Piezo1mRNA表达高于其他牵张应力作用时,而给予48h周期性牵张应力时较给予24h周期性牵张应力时降低,差异有显著性(F=13.917,P0.05)。Western-blot结果显示,牵张应力组给予2h周期性牵张应力时Piezo1蛋白表达较给予0h周期性牵张应力时略有增加,给予24h周期性牵张应力时Piezo1蛋白表达高于其他各组,而给予48h周期性牵张应力时Piezo1蛋白表达较给予24h周期性牵张应力时降低,差异有显著性(F=12.781,P0.05)。牵张应力+Piezo1蛋白抑制剂组Piezo1mRNA及其蛋白表达均明显小于牵张应力组。Piezo1蛋白表达于髓核细胞的细胞质与细胞核,荧光较强。结论人椎间盘髓核细胞中Piezo1蛋白稳定表达,并且与应力加载时间相关。