三酶焦测序体系的建立及其在唐氏综合征快速诊断中的应用

作     者：刘夕群 朱术会 邹秉杰 马寅姣 周国华 

作者机构：南京医科大学基础医学院南京210029 华东医学生物技术研究所南京210002 

出 版 物：《遗传》 (Hereditas（Beijing))

年 卷 期：2010年第32卷第5期

页      面：517-523页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学] 

基　　金：国家人事部留学人员科技活动项目择优资助项目(编号:人社厅发86号)资助 

主　　题：腺苷双磷酸酶 三酶焦测序体系 唐氏综合征 单核苷酸序列多态性 

摘      要：为了避免四酶焦测序体系中由于三磷酸腺苷双磷酸酶(apyrase)造成的测序结果偏差,文章建立了一种定量性能好的无三磷酸腺苷双磷酸酶的三酶焦测序体系。方法是将生物素修饰的DNA模板、荧光素酶和ATP硫酸化酶固定在磁性微球表面进行焦测序反应,当加入一种dNTP进行焦测序反应完后,采用磁性分离技术,除去焦测序反应产生的ATP和剩余的dNTP,然后加入另一种dNTP进行测序,按同样的方法去除影响下一轮测序反应的成分,实现循环测序。此体系能准确判读待测DNA的碱基序列,且可定量测定单核苷酸序列多态性(SNP)中两种等位基因型的相对比值。文章成功检测了16例正常人和8例唐氏综合征患者样本中21号染色体上两个杂合率较高位点(rs1042917和rs4818219)的等位基因型比值,所得结果能够明确说明待测样本中来自于父方和母方的21号染色体数目是否相等。该法具有良好的定量性能,适合于SNP等位基因型的定量分析,可以用于唐氏综合征的快速检测。