利用Cre／loxP系统定位腺苷A2A受体在小鼠视网膜上的分布

作     者：李渊 盛晓 周锡松 安建宏 瞿佳 Yuan Li Xiao Sheng Xisong Zhou Jianhong An Jia Qu

作者机构：温州医科大学附属眼视光医院325027 

出 版 物：《中华眼视光学与视觉科学杂志》 (Chinese Journal Of Optometry Ophthalmology And Visual Science)

年 卷 期：2017年第19卷第6期

页      面：350-355页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81470659) 温州市科技计划项目(Y20140357,Y20150269) 

主　　题：腺苷A2A受体 视网膜 Cre/loxP系统 小鼠 

摘      要：目的：运用Cre/loxP系统来定位腺苷A2A 受体（A2AR）在小鼠视网膜上的分布情况。方法：实验研究。将雄性***（Cg）-Tg（Adora2a-cre KG139Gsat/Mmucd（简称A2A-cre）小鼠与雌性B6．129S6-Gt（ROSA）26Sortm9（CAG-tdTomato）Hze/J（简称Ai9）小鼠交配，对新生小鼠基因型进行鉴定，并选取5 只4 周龄A2A-cre＋，Ai9 鼠，此小鼠表达的Cre酶能敲除Ai9 小鼠中的STOP序列使Tomato荧光蛋白表达。采用免疫荧光方法分别将Tomato红色荧光蛋白与不同类型的视网膜细胞抗体共标记，通过观察Tomato红色荧光蛋白和视网膜细胞特异性抗体的共定位结果，来明确A2AR在视网膜上的定位情况。结果：免疫荧光结果显示Tomato＋细胞主要分布在视网膜神经节细胞层和内核层，外核层并没有发现。其中神经节细胞层中的Tomato＋细胞少数为神经节细胞，多数为异位无长突细胞，而分布于内核层的Tomato＋细胞主要为Müller细胞和无长突细胞。进一步对无长突细胞亚型分析发现，Tomato＋无长突细胞多数为AⅡ型无长突细胞，而胆碱能无长突细胞和多巴胺能无长突细胞并无Tomato＋表达。结论：在4 周龄A2A-cre＋，Ai9 小鼠视网膜中，A2AR主要表达于神经节细胞、无长突细胞和Müller细胞中。