R-(α)-甲基组胺对AtT20垂体瘤细胞Pomc及其转录因子表达的影响

作     者：王晓敏 潘志强 梁龙龙 方肇勤 卢文丽 刘小美 

作者机构：上海中医药大学基础医学院上海201203 

出 版 物：《中国肿瘤》 (China Cancer)

年 卷 期：2017年第26卷第8期

页      面：650-655页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：上海市进一步加快中医药事业发展三年行动计划(2014年-2016年)(ZY3-CCCX-3-3010) 上海市健康辨识与评估重点实验室建设项目(13DZ2261000) 

主　　题：AtT20垂体瘤细胞 R-(α)-甲基组胺 基因表达 Pomc Acth Pou1f1 

摘      要：[目的]研究R-(α)-甲基组胺[R-(α)-MeHA]对AtT20垂体瘤细胞Pomc及其转录因子表达的影响。[方法]以小鼠垂体瘤细胞(AtT20)为实验对象,分别采用0.02~12.5μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞24h,通过MTT检测药物对细胞增殖的影响;采用0.1μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞30min、1、2、4、8、12h等相应时间,运用ELISA方法检测细胞分泌至培养液的促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,RT-q PCR方法检测相关基因mRNA表达,Western blot方法检测相关蛋白表达。[结果]0.02~12.5μmol/L的R-(α)-MeHA对AtT20细胞的增殖无抑制作用更无毒性作用。0.1μmol/L R-(α)-MeHA对AtT20细胞ACTH分泌功能无明显作用。与对照组比较,0.1μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞4h后,可增强阿片促黑素皮质素原(Pomc)基因表达、0.5μmol/L R-(α)-MeHA促进Pomc蛋白表达;此外0.1μmol/L R-(α)-MeHA干预AtT20细胞30min^12h不同时点后Pou1f1基因表达均显著上调,其中以4h最为明显,上调达3倍(P0.05);同样,0.1μmol/L R-(α)-MeHA作用4h也显著促进Egr1基因表达上调约2倍(P0.05);作用1h显著增强了Prop1基因表达,上调近4倍(P0.05);干预4h、8h均显著上调Foxl2基因表达,上调约3倍(P0.05),对Neurod1、Pitx1和Tbx19基因表达无明显影响。[结论]R-(α)-MeHA具有促进Pomc基因以及其转录因子Pou1f1、Egr1、Prop1和Foxl2的表达作用。