长链非编码RNA－肺腺癌转移相关转录子1调控食管癌EC－109细胞侵袭转移的机制

作     者：张清琴 崔艳慧 王颖 寇卫政 曹飞 曹向军 苗战会 康小红 Zhang Qingqin;Cui Yanhui;Wang Ying;Kou Weizheng;Cao Fei;Cao Xiangjun;Miao Zhanhui;Kang Xiaohong

作者机构：新乡医学院第一附属医院肿瘤科卫辉453100 平顶山市第一人民医院骨科467000 

出 版 物：《中华肿瘤杂志》 (Chinese Journal of Oncology)

年 卷 期：2017年第39卷第6期

页      面：405-411页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81503414) 

主　　题：食管肿瘤 长链非编码RNA 微小RNA 肺腺癌转移相关转录子1 上皮间质转化 侵袭 

摘      要：目的观察长链非编码RNA－肺腺癌转移相关转录子1（LncRNA－MALAT1）对食管癌细胞EC－109侵袭和转移的影响，并探讨其可能的作用机制。方法应用慢病毒载体shRNA对照、shRNA－MALAT1转染EC－109细胞，采用实时荧光定量PCR法检测EC－109细胞中LncRNA－MALAT1、miR－200a、ZEB1和ZEB2 mRNA的表达；采用细胞侵袭实验检测EC－109细胞的侵袭能力；采用免疫荧光、Western blot法检测EC－109细胞中上皮间质转化（EMT）信号通路相关蛋白的表达；采用双荧光素酶报告基因实验检测EC－109细胞中MALAT1与miR－200a表达的关系。结果实时荧光定量PCR检测结果显示，未转染组、转染shRNA对照组和转染shRNA－MALAT1组EC－109细胞中MALAT1 mRNA的相对表达量分别为1.00、0.97±0.08和0.43±0.06，转染shRNA－MALAT1组EC－109细胞中MALAT1 mRNA的表达明显降低（P〈0.01）。未转染组、转染shRNA对照组和转染shRNA－MALAT1组EC－109细胞中ZEB1 mRNA的相对表达量分别为1.00、1.06±0.07和0.64±0.04，ZEB2 mRNA的相对表达量分别为1.00、0.98±0.05和0.51±0.04，转染shRNA－MALAT1组EC－109细胞中ZEB1和ZEB2 mRNA的相对表达量均明显降低（均P〈0.05）。转染shRNA－MALAT1组的EC－109细胞的穿膜细胞数为（96.81±10.43）个/低倍视野，与转染shRNA对照组EC－109细胞的穿膜细胞数[（278.44±13.28）个/低倍视野]比较，差异有统计学意义（P〈0.01）。免疫荧光和Western blot法检测结果显示，沉默EC－109细胞中MALAT1基因的表达可下调EMT信号通路相关蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验结果显示，与转染miRNA阴性对照组比较，共转染pmirGLO－MALAT1－wt和miR－200a模拟物可明显减少EC－109细胞的荧光素酶活性，而共转染pmirGLO－MALAT1－mut和miR－200a模拟物不能抑制EC－109细胞的荧光素酶活性。结论LncRNA－MALAT1可能作为竞争性内源RNA，竞争性结合miR－200a，从而上调EC－109细胞中ZEB1和ZEB2的表达，促进EMT进程，导致食管癌的侵袭和转移。