人IL-29定点突变体抗肿瘤细胞增殖活性分析

作     者：李利云 陆源 葛春蕾 彭荣刚 李昕哲 谭敬 陈永康 陈伟 LI Liyun LU Yuan GE Chunlei PENG Ronggang LI Xinzhe TAN Jing CHEN Yongkan CHEN Wei

作者机构：江南大学生物工程学院江苏无锡214122 江南大学药学院江苏无锡214122 江南大学无锡医学院江苏无锡214122 

出 版 物：《食品与生物技术学报》 (Journal of Food Science and Biotechnology)

年 卷 期：2017年第36卷第5期

页      面：553-559页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 0836[工学-生物工程] 10[医学] 

主　　题：人白细胞介素-29 定点突变 重组蛋白 抗肿瘤活性 

摘      要：为分析人白细胞介素-29(h IL-29)变异体抗肿瘤细胞增殖活性,采用大引物PCR方法对人h IL-29基因第104位碱基进行点突变,使h IL-29肽链第35位Arg定点改造为Lys。得到的h IL-29变异体基因经重组后转化毕赤酵母GS115和诱导表达,经纯化获得重组蛋白rh IL-29mut35。SDS-PAGE分析显示rh IL-29mut35的相对分子质量约23×103,Western Blotting鉴定显示其与羊抗人IL-29多克隆抗体发生特异性结合反应。用CCK-8试剂检测rh IL-29mut35对肿瘤细胞增殖的影响,rh IL-29mut35在不同质量浓度时对胃癌细胞SGC7901、肝癌细胞BEL7402、肺腺癌细胞A549和结肠癌细胞HCT8的增殖均有抑制作用,高剂量组(1 000 ng/m L)rh IL-29mut35对胃癌细胞SGC7901、肝癌细胞BEL7402、肺腺癌细胞A549和结肠癌细胞HCT8增值的抑制率分别为(34.20±1.50)%、(27.30±0.31)%、(30.20±0.68)%、(29.13±1.40)%,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P0.01)。而且高剂量组的抗增殖效应高于野生型rh IL-29的(P0.01),这为进一步研制开发IL-29的抗肿瘤药物奠定基础。