人线粒体转录终止因子2(MTERF2)在Caski宫颈癌细胞的表达和定位

作     者：孙美涛 张成桂 梅雯 杨勇琴 杨泽芳 张晓娟 熊伟 SUN Meitao;ZHANG Chenggui;MEI Wen;YANG Yongqin;YANG Zefang;ZHANG Xiaojuan;XIONG Wei

作者机构：大理大学基础医学院云南大理671000 云南省昆虫生物医药研发重点实验室云南大理671000 大理市第一人民医院呼吸内科云南大理671000 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2017年第33卷第6期

页      面：783-788页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100211[医学-妇产科学] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81560458 31601155) 云南省中青年学术与技术带头人后备人才项目(第十九批) 云南省教育厅科学研究基金(2014Z126 2016ZDX105) 大理大学博士科研启动基金(BSKY2012018) 大理大学大学生创新创业计划项目(CXCY-X-2016-13) 

主　　题：线粒体转录终止因子2(MTERF2) Caski宫颈癌细胞 真核表达 蛋白定位 

摘      要：目的构建人线粒体转录终止因子2(MTERF2)基因真核表达载体,并在人Caski宫颈癌细胞中过表达,观察其编码蛋白质在Caski细胞中的定位。方法从Caski细胞中提取总RNA,采用反转录PCR扩增人MTERF2基因可读框序列,将其重组于p3×FLAG-CMV-14载体中,利用PCR和DNA测序鉴定重组子正确性;并用脂质体法转染至Caski细胞,转染24、32、48 h,采用Western blot法检测MTERF2蛋白水平,通过免疫荧光细胞化学染色观察其亚细胞定位情况。结果经过PCR和DNA测序鉴定,人MTERF2基因可读框正确地插入到真核表达质粒中,大小为1158 bp,表达的蛋白相对分子质量(Mr)为44 000,与预计大小相符。转染p3×FLAG-MTERF2质粒的Caski细胞培养24 h,可检测到目的蛋白表达,该蛋白主要定位于线粒体中。结论在Caski细胞成功表达了MTERF2蛋白并证实其定位于线粒体。