培美曲塞对PC9肺腺癌细胞株的放射增敏作用

作     者：赖祥丽 冯国生 高珊 蒿艳蓉 陈晓丹 蓝娇 吕艳茹 LAI Xiang-li;FENG Guo-sheng;GAO Shan;HAO Yan-rong;CHEN Xiao-dan;LAN Jiao;L(U) Yan-ru

作者机构：广西壮族自治区人民医院化疗一区广西南宁530000 广西壮族自治区人民医院科研实验中心广西南宁530000 

出 版 物：《中华肿瘤防治杂志》 (Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment)

年 卷 期：2017年第24卷第9期

页      面：584-588页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100214[医学-肿瘤学] 100106[医学-放射医学] 10[医学] 

基　　金：广西科技厅项目(桂科攻0632007-1L) 

主　　题：肺腺癌 PC9细胞 培美曲塞 放射增敏 CDC20 

摘      要：目的培美曲塞是治疗非鳞癌非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的常用药物,其对表皮生长因子受体(pithelial growth factor receptor,EGFR)敏感突变的肺腺癌是否具有放射增敏作用尚未明确。本课题研究培美曲塞在体外对EGFR 19外显子突变的人肺腺癌细胞株PC9的放射增敏作用,并初步探讨其作用机制。方法以PC9细胞作为研究对象,采用MTT法检测培美曲塞的20%抑制浓度(20%inhibition concentration,IC_(20)),将PC9细胞分为对照组、单独照射组、培美曲塞单药组和培美曲塞+照射组4组;采用流式细胞术检测培美曲塞联合或不联合照射对PC9细胞的凋亡率及细胞周期的影响;克隆形成实验检测培美曲塞对PC9细胞的放射效应,计算存活分数,拟合存活曲线;蛋白质印迹法检测CDC20蛋白在各组的表达。结果 MTT结果显示,PC9细胞的增殖抑制与培美曲塞呈时间-剂量依赖性,取48h的IC_(20)(0.084μmol/L)的培美曲塞作为实验浓度。流式细胞术结果显示,培美曲塞单药组和单独照射组均可增加凋亡率,分别为(7.17±1.14)%和(10.78±1.52)%,而培美曲塞+照射组具有协同增效作用,凋亡率达(29.23±1.33)%,F=227.57,P0.001;细胞周期结果显示,对照组G_2/M期比例为(0.79±0.63)%,培美曲塞单药组为(0.79±0.47)%,单独照射组为(18.21±0.72)%,培美曲塞+照射组为(25.09±1.04)%,提示培美曲塞使细胞阻滞在S期,与放射线联合作用后,S期细胞比例减少,G_2/M期的比例明显增多,差异有统计学意义,F=276.85,P0.001。克隆形成实验提示,培美曲塞具有较好的放射增敏作用,其放射增敏比(sensitization enhancement ratio,SER)为1.41。培美曲塞联合照射能增加细胞周期相关蛋白CDC20的表达,F=282.12,P0.001。结论培美曲塞可提高EGFR 19外显子突变的PC9肺腺癌细胞的放射敏感性,其机制可能与照射引起CDC20的增加致对放射敏感的G_2/M期阻滞,而照射耐受的S期比例减少有关。