无标记细胞检测方法揭示舒血宁注射液对血栓素A2受体亚型的选择性抑制作用

作     者：郭春英 宁召臣 董鹏志 朱彦 Guo Chunying;Ning Zhaochen;Dong Pengzhi;Zhu Yan

作者机构：天津中医药大学天津市现代中药国家重点实验室天津300193 天津国际生物医药联合研究院中药新药研发中心天津300457 

出 版 物：《中药药理与临床》 (Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2017年第33卷第2期

页      面：86-91页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81274128) 天津市高等学校创新团队(TD12-5031) 

主　　题：舒血宁注射液 血栓素A2受体 Label-free 

摘      要：目的:构建人源血栓素A2受体(Thromboxane A2 receptor,TXR)Label-free细胞检测体系,并采用以检测中药注射剂舒血宁注射液及其活性组分对该受体的作用。方法:构建TXRα、TXRβ表达质粒,及稳定表达TXRα或TXRβ的HEK293细胞系;通过Label-free细胞检测方法,使用TXR特异性激动剂U46619及拮抗剂SQ-29548对TXRα-HEK293和TXRβ-HEK293稳定转染细胞系进行功能鉴定,并利用该体系辨识舒血宁注射液及其总黄酮、总内酯组分对TXRα和TXRβ的作用。结果:基因测序结果表明,成功构建TXRα、TXRβ表达质粒;PCR结果表明,成功建立了TXRα-HEK293和TXRβ-HEK293稳定转染细胞系;Label-free细胞检测结果显示U46619和SQ-29548能够分别特异性激活和拮抗受体,表明TXRα和TXRβLabel-free细胞检测体系构建成功;Label-free细胞检测结果表明舒血宁注射液能够抑制TXRβ,对TXRα无影响。结论:成功建立TXRα和TXRβLabel-free细胞检测体系,并发现舒血宁注射液能够选择性作用于TXRβ,提示舒血宁注射液可通过抑制TXRβ发挥其药理活性。