Sonic Hedgehog通过调控促分裂原活化的蛋白激酶／胞外信号调节激酶信号通路促进类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖

作     者：刘芳 朱尚玲 冯晓雪 罗敏琪 张白玉 李朝霞 王晓红 潘云峰 黄建林 Liu Fang;Zhu Shangling;Feng Xiaoxue;Luo Minqi;Zhang Baiyu;Li Zhaoxia;Wang Xiaohong;Pan Yunfeng;Huang Jianlin

作者机构：中山大学附属第三医院风湿免疫科广州510630 中山大学附属第六医院风湿免疫科 

出 版 物：《中华风湿病学杂志》 (Chinese Journal of Rheumatology)

年 卷 期：2017年第21卷第5期

页      面：310-315,I0001页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81571584) 广东省科技计划项目(20138021800076) 

主　　题：关节炎 类风湿 Sonic Hedgehog 丝裂原激活蛋白激酶激酶类 细胞增殖 

摘      要：目的初步探讨促分裂原活化的蛋白激酶/胞外信号调节激酶（MAPK/ERK）信号通路在Sonic Hedgehog（Shh）调控RA成纤维样滑膜细胞（RA-FLS）增殖中的作用。方法收集病情活动（DAS28≥3.2）的RA患者经关节镜下滑膜清理术或关节置换术切除的滑膜组织，组织块培养法培养分离RA-FLS，分别予Shh激动剂purmorphamine、抑制剂cyclopamine及MAPK/ERK信号通路抑制剂U0126处理，采用蛋白质印迹法检测RA-FLS细胞MAPK/ERK信号通路关键蛋白phospho ERK1/2（p-ERK1/2）磷酸化水平，细胞增殖与毒性试剂盒（CCK8）检测细胞增殖活力，以及流式细胞术检测细胞增殖情况，采用单因素方差分析和Kruskal-Wallis H（K）方法对数据进行分析。结果与对照组相比，浓度为1 μmol/L的purmorphmine可短时间内引起p-ERK1/2蛋白表达增加，作用15 min时显著（P〈0.01），经U0126和cyclopamine处理后，p-ERK1/2蛋白表达明显下降（P〈0.01）。RA-FLS经purmorphmine（1 μmol/L）处理后，细胞增殖活力为（114±5）%，明显高于对照组（100±0）%（P〈0.01），purmorphmine（1 μmol/L）组S期细胞占（8.39±0.60）%，较对照组（3.29±0.69）%明显增加（P〈0.01）；经cyclopamine（10 μmol/L）处理后，细胞增殖活力为（89±1）%（P〈0.05），S期细胞占（1.53±0.22）%（P〈0.05）；经purmorphamine（1 μmol/L）和U0126（10 μmol/L）共同处理后，细胞增殖活力为（89±2）%（P〈0.05），S期细胞占（1.07±0.25）%（P〈0.05）。结论Shh可能通过调控MAPK/ERK信号通路，促进RA-FLS细胞增殖，促进滑膜增生，导致RA疾病的进展。