小鼠诺如病毒巢式RT-PCR检测方法的建立与应用

作     者：张旭亮 马畅 刘捷 尤金炜 刘彪 恽时锋 ZHANG Xu-liang;MA Chang;LIU Jie;YOU Jin-wei;LIU Biao;YUN Shi-feng

作者机构：南京军区南京总医院比较医学科全军实验动物科普与伦理教育基地/全国科普教育基地江苏南京210002 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2017年第47卷第4期

页      面：508-513页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：中国人民解放军南京军区南京总医院科学研究项目(2016051) 

主　　题：小鼠诺如病毒 巢式RT-PCR 敏感性 

摘      要：本研究旨在利用巢式RT-PCR技术,建立高效检测小鼠诺如病毒(murine norovirus,MNV)的方法。通过Gen Bank上公布的一系列小鼠诺如病毒的基因序列,设计内、外各一对特异性引物,通过优化PCR反应条件,建立巢式RT-PCR检测方法,并对临床样品进行检测。结果显示,本研究建立的巢式PCR检测方法特异性好,最低检出量为1×102copies/L,高于使用参考引物RT-PCR的最低检出量1×105 copies/L,对临床样品检出率为73%,高于使用参考引物普通RT-PCR的检出率(60%),与RT-qPCR方法检出率一致。结果表明,本研究成功建立了一种检测小鼠诺如病毒的巢式RT-PCR方法,并能快速、高效地应用于临床样品的检测,为小鼠诺如病毒的诊断和检测提供了有力的手段。