转染血管紧张素Ⅱ受体反义核苷酸对心肌细胞生长的作用

作     者：杨永健 祝善俊 祝之明 胡厚祥 丁钢 YANG Yong-jian;ZHU Shan-jun;ZHU Zhi-ming;HU Hou-xiang;DING Gang

作者机构：第三军医大学附属新桥医院心血管内科重庆400037 第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所高血压中心重庆400042 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2001年第23卷第4期

页      面：401-403页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目!(3 9770 3 1 4 3 972 50 1 3 ) 重庆市科委资助项目 

主　　题：血管紧张素Ⅱ 受体 反义核苷酸 心肌细胞 细胞生长 基因转染 

摘      要：目的 评价转染AT1反义核苷酸 (AT1A)对心肌细胞血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )受体亚型mRNA表达 ,及蛋白质和核酸合成的作用。方法 RT PCR克隆AT1cDNA序列 (476bp) ,将克隆的AT1cDNA反向插入PcDNA3 .1(5 .4kb) ,构建一完整的含AT1A的质粒 (PAT1A) ,并转染入培养的心肌细胞 ,RT PCR和免疫印迹鉴定其转染后AT1mRNA和蛋白表达。比较AngⅡ 10 -7mol/L剌激 2 4h后的转染及非转染的心肌细胞AT1及AT2 mRNA表达 (RT PCR)、蛋白质和核酸合成 (3 H Leu及3 H TdR掺入量 )。结果 成功构建PAT1A。转染心肌细胞AT1mRNA和蛋白表达量显著减少 ,与正常对照心肌细胞相比差异有非常显著性 (P 0 .0 5 )。结论 经AT1A封闭后 ,心肌细胞AT1mRNA表达显著抑制 ,同时AT2 mRNA上调。