大肠杆菌外膜蛋白OmpW的克隆及在外膜上高表达

作     者：邹海杰 吴贤斌 潘建义 赵辅昆 ZOU Hai-jie;WU Xian-bin;PAN Jian-yi;ZHAO Fu-kun

作者机构：浙江理工大学生命科学学院杭州310018 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2011年第31卷第12期

页      面：46-50页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：浙江省自然科学基金(Y2090396) 浙江省公益技术研究社会发展项目(2011C23067)资助项目 

主　　题：大肠杆菌K12 OmpW 重组载体 抗血清制备 

摘      要：目的:利用表达载体pLLP-OmpA实现大肠杆菌K12外膜蛋白OmpW在外膜上高表达。方法:PCR扩增ompW基因,构建重组表达载体pLLP-OmpA-ompW,然后转化大肠杆菌K12,得到在外膜上高表达的菌株。提取该菌外膜蛋白,利用免疫小鼠制备得到的抗血清进行Western blot分析验证高表达的OmpW是否定位于外膜。结果:成功构建了重组表达载体,经转化后成功筛选到高表达菌株,并经Western blot证实高表达的OmpW定位在外膜上。结论:首次成功获得OmpW在外膜上的高表达,该高表达菌株可为深入研究OmpW在细菌致病机制中的作用及其它功能提供研究基础。