马铃薯Y病毒P3N-PIPO酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

作     者：袁军涛 黄增飞 叶慧燕 唐瑶 温荣辉 Yuan Juntao;Huang Zengfei;Ye Huiyan;Tang Yao;Wen Ronghui

作者机构：广西大学生命科学与技术学院南宁530005 广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530005 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2017年第36卷第1期

页      面：299-304页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 

基　　金：国家自然科学基金(31260030) 广西回国基金重点项目(2013GXNSFCB019003)共同资助 

主　　题：PVY P3N—PIPO 酵母双杂交 诱饵质粒 

摘      要：P3N-PIPO是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)病毒基因组中近年来新鉴定的编码蛋白。为研究P3N-PIPO在病毒与宿主互作过程中的功能,本研究以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)和马铃薯作为研究系统,用融合PCR技术扩增得到PVY编码蛋白P3N-PIPO的DNA序列,用于构建酵母双杂交诱饵质粒。为钓取马铃薯组织细胞内不同位置的互作蛋白,本研究构建了p BT3-N-P3N-PIPO、p BT3-C-P3N-PIPO、p BT3-STE-P3N-PIPO、p BT3-SUC-P3N-PIPO和p DHB1-P3N-PIPO 5个诱饵质粒,并进行自激活或毒性检测,最终获得p BT3-STE-P3N-PIPO、p BT3-SUC-P3N-PIPO和p DHB1-P3N-PIPO 3个可用于筛选马铃薯c DNA文库的诱饵质粒。