蟾毒灵与顺铂协同抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的机制探讨

作     者：闫顺朝 焦昕 李凯 邹华伟 YAN Shunchao;JIAO Xin;LI Kai;ZOU Huawei

作者机构：中国医科大学附属盛京医院肿瘤科沈阳110022 沈阳市胸科医院呼吸一科110044 

出 版 物：《临床肿瘤学杂志》 (Chinese Clinical Oncology)

年 卷 期：2016年第21卷第12期

页      面：1057-1062页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81302313) 辽宁省科学技术计划资助项目(2014226033) 

主　　题：乳腺癌 蟾毒灵(Bufalin) 顺铂 协同 凋亡 

摘      要：目的探讨蟾毒灵(Bufalin)联合顺铂对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响,并探讨可能的协同机制。方法采用MTT法检测空白对照组(仅培养液)、单纯细胞对照组和实验组的细胞增殖率,实验组加入不同浓度的顺铂或Bufalin单药或以固定比例(Bufalin∶顺铂=1 nmol/L∶1μmol/L)联合作用24 h。分别采用20 nmol/L Bufalin、20μmol/L顺铂单药或联合作用24 h,用流式细胞术检测细胞凋亡,并用Western Blotting检测活化的Met(p-Met)、Met、活化的Src(p-Src)、Src、PARP及其裂解cleaved PARP蛋白的表达。结果 MTT法检测显示,顺铂和Bufalin均以剂量依赖方式抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖。在顺铂≥0.1μmol/L和Bufalin≥0.1 nmol/L时两药联合作用可协同抑制MCF-7细胞增殖(0CI0.433)。流式细胞术检测显示,20μmol/L顺铂作用24 h可诱导(10.7±4.8)%的MCF-7细胞凋亡,而20 nmol/L Bufalin作用24 h未明显诱导细胞凋亡,20 nmol/L Bufalin与20μmol/L顺铂联合作用24 h后可诱导(40.8±8.5)%的MCF-7细胞凋亡。Western Blotting检测显示,顺铂作用后可导致Met和Src活化,Bufalin与顺铂联合作用后可抑制顺铂诱导的Met和Src活化,同时上调PARP裂解。结论 Bufalin可能通过抑制顺铂诱导的Met和Src活化与顺铂协同抑制MCF-7细胞增殖,增强顺铂诱导的细胞凋亡。