补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞PI3K/AKT信号转导通路影响的实验研究

作     者：刘亚莉 易佳丽 王莹 井欢 刘春英 LIU Ya-li;YI Jia-li;WANG Ying;JING Huan;LIU Chun-ying

作者机构：辽宁中医药大学基础医学院病理学教研室沈阳110032 辽宁卫生职业技术学院医学技术系卫生检验教研室沈阳110101 

出 版 物：《中国医科大学学报》 (Journal of China Medical University)

年 卷 期：2014年第43卷第1期

页      面：14-18页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81072743) 

主　　题：补中益气汤 磷脂酰肌醇3激酶 磷酸化蛋白激酶 

摘      要：目的观察补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞A549/DDP的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白和mRNA表达的影响。方法以SD大鼠制备高、中、低剂量的补中益气汤含药血清和空白对照血清。MTT法筛选最佳含药血清组。培养细胞分为空白血清组、最佳含药血清组、LY294002组(阻滞剂组)、最佳含药血清+LY294002组(联合组)和阴性对照组。免疫细胞化学方法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测PI3K、p-AKT蛋白和mRNA的表达情况。结果随着含药血清浓度的升高,对顺铂的逆转倍数不断增加;中剂量含药血清作用48 h为最佳含药血清及最佳作用时间;最佳含药血清可使A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT蛋白表达减少,与空白血清组比较差异有统计学意义(P0.05);补中益气汤诱导A549/DDP细胞PI3K、p-AKT mRNA表达显著减少,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P0.05),与阻滞剂联合作用p-AKT mRNA下降更为明显。结论补中益气汤可通过降低A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT mRNA的表达而影响PI3K/AKT信号转导通路,进而发挥对顺铂耐药的增敏作用。