重组融合蛋白EGF-E4orf4多聚体的鉴定及结构分析

作     者：倪蓓蓓 范真真 陈虹 黄秉仁 NI Bei-bei;FAN Zhen-zhen;CHEN Hong;HUANG Bing-ren

作者机构：中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2012年第32卷第7期

页      面：1-7页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家"863"计划资助项目(2008AA02Z118) 

主　　题：EGF-E4orf4 多聚体 光散射 圆二色谱 生物学活性 

摘      要：目的:确认重组融合蛋白EGF-E4orf4为多聚体及其具有EGFR结合活性。方法:通过凝胶过滤层析、SDS-PAGE和免疫印迹分析重组融合蛋白EGF-E4orf4是否形成聚合物。利用动态光散射、静态光散射和圆二色谱测定EGF-E4orf4的分子半径、分子量和二级结构。应用流式细胞术分析EGF-E4orf4与细胞表面EGFR结合能力。结果:凝胶过滤等方法证实EGF-E4orf4形成了多聚体,光散射实验证明了EGF-E4orf4多聚体的分子量和分子半径分别为1.656×107Da、67.90nm,约为820聚体。圆二色谱表明该聚合体融合蛋白含有大量的β-折叠结构。受体结合实验证明该聚合物具有EGFR结合活性。结论:重组融合蛋白EGF-E4orf4以蛋白多聚体形式存在,可以与EGFR结合。因此,EGF-E4orf4作为一种新型靶向性抗肿瘤药物,具有潜在的临床应用前景。