超声联合微泡介导神经营养因子-3基因转染神经干细胞实验研究

作     者：宫琳 陈芸 万圣祥 江长青 谭文 严飞 郑海荣 

作者机构：北京大学深圳医院超声科 北京大学深圳医院显微手外科 中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所保罗.C.劳特伯生物成像研究中心 

出 版 物：《中国超声医学杂志》 (Chinese Journal of Ultrasound in Medicine)

年 卷 期：2012年第28卷第9期

页      面：769-772页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

基　　金：深圳市科技计划重点项目(No.200901014) 

主　　题：超声 微泡 神经营养因子-3 神经干细胞 基因转染 

摘      要：目的探讨体外利用超声联合微泡介导神经营养因子-3（neurotrophin-3,NT-3）基因转染神经干细胞的有效性和适宜超声参数。方法体外培养神经干细胞,在24孔板中加入200μl微泡（3×10;/ml）和20μl pEGFP-NT 3基因重组质粒（1μg/μl）,再加入500μl神经干细胞悬液（5×10;/ml）,在不同的超声条件下（声强分别为1、1.5、2 W/cm;,照射时间分别为30、60、90、120、150 s）,用1 MHz非聚焦探头辐照上述混合液,转染后在荧光显微镜下观察重组质粒转染效率,锥虫蓝染色检测神经干细胞活性。空白对照组为无超声辐照的质粒与神经干细胞的混合物。结果 （1）转染48 h后绿色荧光表达最强;（2）声强1.5 W/cm;、照射时间60 s为本实验适宜的超声条件,此时神经干细胞基因转染率最高,且细胞活性较高。结论超声联合微泡介导NT 3基因转染神经干细胞具有可行性,为神经干细胞基因转染提供了新方法 。