乳粉中阪崎肠杆菌污染检测试剂盒的研制

作     者：宋春美 朱政辉 李建武 刘箐 SONG Chunmei;ZHU Zhenghui;LI Jianwu;LIU Qing

作者机构：上海理工大学医疗器械与食品学院上海200093 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2016年第37卷第24期

页      面：233-238页

核心收录：

学科分类：08[工学] 082203[工学-发酵工程] 0822[工学-轻工技术与工程] 

基　　金：上海市"科技创新行动计划"长三角科技联合攻关领域项目 中国博士后基金项目(2015M581637) 2016年度上海理工大学国家级项目培育基金项目(16HJPY-QN09) 

主　　题：双抗体夹心法 酶联免疫吸附试剂盒 灵敏 快速检测 致病菌 

摘      要：目的：以乳粉中污染的阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）为检测目标,开发一种能快速检测其污染的试剂盒。方法：以两株阪崎肠杆菌单克隆抗体分别为包被抗体和检测抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附实验方法,优化各个反应条件,制成在2 h内能发生显色反应的检测试剂盒。结果：包被抗体的最佳工作质量浓度为10？μg/mL,检测抗体的最佳稀释倍数为1∶5 000。试剂盒的检测限为10^4 CFU/mL,在10^4～10^8 CFU/mL范围内OD450 nm值与阪崎肠杆菌浓度的常用对数值呈线性关系。特异性实验中,试剂盒可检出3株阪崎肠杆菌标准菌株,对其他9株食品中常见致病菌的检测均呈阴性。模拟带菌实验中,初始菌浓度为1 CFU/mL的模拟样品经过8 h前增菌后,通过该试剂盒便可检出。该试剂盒的批内、批间变异系数均小于6%,至少可在室温保存6个月。结论：该双抗体夹心试剂盒具有灵敏度高、特异性好、精密度高、稳定性强等优点,可应用于乳粉中阪崎肠杆菌的快速检测。