不同沉淀方法处理胶乳总RNA对基因扩增效率的影响

作     者：吴春太 黎瑜 冯伟瑜 曾日中 

作者机构：中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南省热带作物栽培生理学重点实验室儋州571737 海南大学农学院海口570228 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2016年第32卷第11期

页      面：124-129页

学科分类：08[工学] 0829[工学-林业工程] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31270713) 橡胶研究所基本科研业务费资助项目(1630022012008) 

主　　题：橡胶树胶乳 总RNA提取 RNA沉淀 

摘      要：为探明沉淀方法对胶乳总RNA提取及PCR扩增效率的影响,并寻求较好的RNA沉淀方法,针对胶乳中蛋白、多糖、橡胶粒子含量高的特点,在本实验室改进的SDS法的基础上,分别用Li Cl、Na Cl+异丙醇、Na Cl+Na Ac+无水乙醇和Na Ac+无水乙醇对橡胶树胶乳总RNA进行沉淀,并对所得RNA的完整性、纯度、含量和RT-PCR扩增效率进行比较。结果表明,4种方法均可获得完好的RNA,但其纯度、含量和PCR扩增效率随方法不同而有所差别,其中Na Cl+Na Ac+无水乙醇沉淀的橡胶树胶乳总RNA纯度、产率和18S、REF基因扩增效果均较高,故认为用Na Cl+Na Ac+无水乙醇沉淀胶乳总RNA是一种较为有效的方法。