过量表达杜鹃红山茶CaAPX1的烟草耐热性提高

作     者：王江英 邵小斌 殷恒福 范正琪 李辛雷 吴斌 倪穗 李纪元 

作者机构：连云港市农业科学院花卉研究中心江苏连云港222006 中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术研究重点实验室杭州311400 宁波大学海洋学院浙江宁波315211 

出 版 物：《园艺学报》 (Acta Horticulturae Sinica)

年 卷 期：2016年第43卷第11期

页      面：2203-2213页

核心收录：

学科分类：090706[农学-园林植物与观赏园艺] 0907[农学-林学] 09[农学] 

基　　金：引进国际先进林业科学技术项目(2014-4-16) 连云港市第五期‘521工程’项目 宁波市农业科技专项项目(2014C11002) 

主　　题：山茶 杜鹃红山茶 耐热性 表达分析 转基因烟草 

摘      要：根据山茶（Camellia japonica）同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3′,5′-RACE技术,从杜鹃红山茶（***）嫩叶组织中克隆出抗坏血酸过氧化物酶（ascorbate peroxidase,APX）基因,命名为CaAPX1（Gen Bank登录号：KP635267）,基因全长1 097 bp,开放阅读框753 bp,编码250个氨基酸。实时荧光定量分析发现,CaAPX1在4种不同的山茶中均得到表达,其中较耐热的微花连蕊茶（***）表达量最高,其次是中等耐热的杜鹃红山茶和‘耐冬’山茶（***‘Naidong’）,最低的为耐热性较差的‘恨天高’云南山茶（***‘Hentiangao’）。结果表明该基因的表达量高低与测试物种的耐热性有关。CaAPX1在杜鹃红山茶4种组织中均得到表达,表达量由高到低依次为：叶片、花蕾、种胚、花芽,其中叶片表达量高达其他组织的1.29-4.26倍。CaAPX1转基因烟草分析表明,过量表达CaAPX1后,APX酶活性提高了2.58-3.81倍,抗坏血酸（Ascorbate,AsA）含量也提高了2.67-3.56倍,并且转基因烟草植株及其种子的耐热能力也提高。