人VEGF基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究(英文)
Transfection of human VEGF_(165) gene into bone marrow mesenchymal stem cells in rats作者机构:中南大学湘雅二医院心胸外科长沙410011
出 版 物:《中南大学学报(医学版)》 (Journal of Central South University :Medical Science)
年 卷 期:2006年第31卷第3期
页 面:313-318页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金:This project was supported by Committee of Provincial Science Study Foundation of Hunan(03TCY2012)
摘 要:目的:建立人血管内皮生长因子165(hVEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的方法。方法:采用密度梯度离心-贴壁培养法获Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),测定其生长曲线和表面标志CD34,CD44,CD45及SH3,检测其向成骨细胞及脂肪细胞诱导分化潜能后;用脂质体介导法将pcDNA3.1-hVEGF165导入MSCs,观察转染后细胞形态和生长状况,通过RT-PCR,Western blot和ELISA鉴定VEGF在MSCs中的表达情况。结果:大鼠MSCs经检测为CD44和SH3阳性,CD45和CD34阴性,可诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞;经RT-PCR,Western和ELISA检测证实阳离子脂质体能成功地将hVEGF165转染至大鼠MSCs,并获得有效的表达。结论:真核表达载体pcDNA-VEGF在MSCs中获有效表达。