霍乱弧菌DsbA蛋白通过增强MSHA的表达促进生物被膜的形成

作     者：薛媛媛 吴春琴 江秀军 甘超宁 宋厚辉 杨梦华 Yuanyuan Xue;Chunqin Wu;Xiujun Jiang;Chaoning Gan;Houhui Song;Menghua Yang

作者机构：浙江农林大学动物科技学院浙江临安311300 温州科技职业学院动物科学系浙江温州325006 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2016年第56卷第11期

页      面：1730-1736页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(31300082 31470244) 浙江农林大学科研发展基金(2013FR012) 浙江省2015年度高校国内访问学者专业发展项目(178)~~ 

主　　题：霍乱弧菌 生物被膜 VcDsbA MSHA 

摘      要：【目的】阐明霍乱弧菌DsbA蛋白(VcDsbA)在生物被膜形成过程中的作用。【方法】采用Overlapping PCR的方法构建VcdsbA基因敲除质粒p MH524;采用同源重组和基因克隆的方法对霍乱弧菌dsbA(vc0034)基因进行敲除和回补;通过结晶紫染色实验,比较野生株(WT)、dsbA突变株(ΔdsbA)和回补菌株(CΔdsbA)的生物被膜形成差异;用荧光素酶基因作为报告基因分析与生物被膜形成相关的甘露糖敏感血凝素纤毛合成蛋白(Mannose-sensitive hemagglutinin,pili biogenesis protein,MSHA)在霍乱弧菌WT、ΔdsbA和CΔdsbA中表达水平的区别。【结果】成功构建霍乱弧菌dsbA基因缺失突变株和回补株;与WT相比,ΔdsbA生物被膜形成能力显著下降,且msh操纵子的表达水平显著降低。【结论】VcDsbA可能通过影响其它调控因子直接或间接增强霍乱弧菌MSHA的生物合成,从而促进霍乱弧菌生物被膜的形成。本文为进一步研究DsbA在霍乱弧菌生物被膜形成中的调控机制奠定了基础。