斑节对虾含硒谷胱甘肽过氧化物酶基因全长克隆及表达分析

作     者：唐蕾 傅明骏 赵超 邱丽华 刘文生 江世贵 TANG Lei;FU Mingjun;ZHAO Chao;QIU Lihua;LIU Wensheng;JIANG Shigui

作者机构：中国水产科学研究院南海水产研究所农业部南海渔业资源开发利用重点实验室 华南农业大学动物科学学院 中国水产科学研究院南海水产研究所热带水产研究开发中心 

出 版 物：《水产学报》 (Journal of Fisheries of China)

年 卷 期：2016年第40卷第11期

页      面：1664-1673页

核心收录：

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：现代农业产业技术体系建设专项(CARS-47) 广东省科技计划项目(2014B020202003) 海南省应用技术研发与示范推广专项(ZDXM2015056) 深圳市生物产业发展专项资金现代农业生物产业推广扶持计划(NYSW20140331010053)~~ 

主　　题：斑节对虾 含硒谷胱甘肽过氧化物酶 卵巢发育 Cu2+胁迫 

摘      要：为了研究含硒谷胱甘肽过氧化物酶（selenium-dependent glutathione peroxidase,SeGPx）在斑节对虾应激反应和卵巢发育中的作用,实验以斑节对虾肝胰腺转录组数据中筛选获得的Se-GPx基因（Pm Se-GPx）片段为基础,利用RACE技术获得Pm Se-GPx基因的c DNA全长,并对其进行了生物信息学分析;利用荧光定量PCR技术研究了Pm Se-GPx在斑节对虾不同组织、卵巢发育各期、肝胰腺组织在pH9、硫酸铜(Cu;)应激下的相对表达量和变化趋势。结果显示,Pm Se-GPx基因c DNA全长为959 bp,5’非编码区（UTR）长10bp,开放阅读框（ORF）长639 bp,编码212个氨基酸,310 bp的3’UTR包含一个硒代半胱氨酸插入序列（SECIS）,ORF中的密码子209TGA211编码硒代半胱氨酸（selenocysteine,U67）。实时定量PCR实验结果表明,Pm Se-GPx在斑节对虾的肝胰腺、卵巢、精巢、心脏等组织中均有表达,其中肝胰腺中表达量显著高于其他组织,卵巢次之;卵巢发育阶段表达结果则显示Pm Se-GPx在卵巢发育各期均有表达,在卵巢Ⅲ期表达量最高,其次是V期;在Cu;胁迫下,其表达量总体呈现先下降后上升然后又下降的趋势;在环境pH为9胁迫下,表达趋势呈现先下降,后回升,然后又下降,再大幅上升的趋势。研究表明,SeGPx在斑节对虾卵巢发育过程中具有重要作用,且Se-GPx参与斑节对虾对环境理化因子应激的免疫调控。