红色链孢霉RNase N1高产菌株的选育

作     者：张其玖 刘增印 Zhang Qi-jiu Liu Zeng-yin (Institute of Biophysics,Academia Sinica,Beijing)

作者机构：中国科学院生物物理研究所 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：1980年第2期

页      面：150-156页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：产酶量 菌株发酵 发酵液 水解作用 均聚 豆饼粉 营养缺陷型 产酶能力 粗酶液 

摘      要：本文介绍了红色链孢霉（Neurospora crassa）RNase N1高产菌株的选育和 RNase N1的鉴定。1.以红色链孢霉3.1602（鸟氨酸缺陷型）为原始菌株,经1/5000三乙撑四胺30℃振荡处理2小时,继以60钴照射4分钟（13.2千伦琴/分钟）,照射剂量为52.8千伦琴。分离得到红色链孢霉 OA047菌株（鸟氨酸-腺嘌呤双重营养缺陷型）。以红色链孢霉3.1604（野生型）为原始菌株,经100微克分子 MN’NG 28℃振荡处理2小时,分离得到红色链孢霉 WA01l（腺嘌呤营养缺陷型）。这两个菌株在改良的 Frie’s 培养基上,比原始菌株产酶能力分别提高约20倍。2.红色链孢霉 OA047菌株在5%麸皮培养基中,28℃振荡培养72小时,酶产量为114.5单位/毫升。红色链孢霉 WA011菌株在5%豆饼粉培养基中,产酶量为100单位/毫升。两个菌株产酶能力比在 Frie’s 培养基中又提高了五倍。3.红色链孢霉 OA047菌株发酵的粗酶液中不含有磷酸单酯酶和其它磷酸二酯酶。RNase的活力十分稳定,在 pH1.5—2.0条件下,加热80℃2分钟,酶活力未见降低。红色链孢霉OA047菌株产生的 RNase,经测定其天然 RNA 酶解产物末端核苷3′-磷酸,和该酶对人工均聚多核苷酸水解作用,以及对2′,3′GP 的水解作用等项分析证明是 RNase N1。