肝素酶介导的肝癌细胞与血管内皮细胞黏附及穿内皮迁移

作     者：陈晓鹏 江雯 张文君 崔巍 CHEN Xiaopeng

作者机构：皖南医学院附属弋矶山医院肝胆外科安徽芜湖241001 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2016年第23卷第5期

页      面：656-662页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81272412)~~ 

主　　题：肝素酶 肝细胞癌 血管内皮细胞 微血管捕获 黏附 迁移 

摘      要：目的:探讨肝素酶(heparanase,HPSE)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞与血管内皮细胞黏附及穿内皮迁移的影响。方法:选用人正常脐静脉内皮细胞株HUVEC-C,肝LO-2细胞,肝癌Hep G2、BEL-7402和HCCLM3细胞,用Real-time PCR筛选高表达HPSE的HCC细胞;设计4个HPSE基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)序列、构建质粒,并筛选出最优RNAi质粒;用该RNAi质粒转染高表达HPSE的HCC细胞,同时设空白对照组、阴性对照组和未转染的HCC细胞组;黏附试验观察各组HCC细胞与HUVEC-C细胞的黏附情况;Transwell小室法观察HCC细胞穿HUVEC-C细胞迁移情况;癌细胞均以0.25%玫瑰红染色、光镜下观察;酶标仪法分别测定脱色后各组细胞D值并分析比较。结果:HCCLM3细胞HPSE mRNA表达水平显著高于肝LO-2、Hep G-2和Bel-7402细胞[(5.72±0.62)vs(1.05±0.09)、(2.65±0.31)和(3.43±0.58),均P0.01)];设计的4个HPSE之RNAi载体,以si HPSE-3158对HPSE基因表达的抑制效果最佳(P0.05)。RNAi组HCCLM3细胞与HUVEC-C细胞黏附率显著低于空白对照组、阴性对照组和未转染的HCCLM3细胞组[(0.31±0.04)vs(0.46±0.06)、(0.45±0.05)和(0.64±0.09),均P0.01)]。RNAi组HCCLM3细胞穿HUVEC-C细胞迁移率也显著低于空白对照组、阴性对照组和未转染的HCCLM3细胞组[(0.28±0.03)vs(0.41±0.04)、(0.41±0.05)和(0.43±0.05),均P0.05)]。结论:HPSE参与介导HCC细胞与血管内皮细胞的黏附及HCC细胞穿内皮迁移,可能是HCC微血管捕获、血行转移的重要因素。