碱变性、羟基磷灰石柱层析提取质粒DNA
A SIMPLE PURIFICATION METHOD FOR PLASMID DNA作者机构:军事医学科学院基础医学研究所
出 版 物:《军事医学》 (Military Medical Sciences)
年 卷 期:1984年第2期
页 面:183-186页
主 题:DNA RNA 缓冲液 质粒 基因载体 柱层析 碱变性法 超速离心机
摘 要:前言提取质粒DNA的方法很多,目前常用的方法有酸酚法、两相法、碱变性法等。但这些方法都不易将质粒DNA中的RNA去除干净,这样不但会影响质粒DNA中的准确定量,酶切DNA片段的分离,而且会影响DNA片段的5′末端以r[P]-ATP和多核苷酸激酶的标记。氯化铯梯度离心虽然能将质粒DNA中的RNA去除干净,但此法需要贵重的仪器超速离心机和氯化铯。羟基磷灰石柱层析也可去除质粒DNA中的RNA,但在柱层析之前一般是采用溶菌酶和TritonX-100将菌体裂解,然后25000rpm