柱孢菌细胞色素P－450nor2cDNA克隆与表达
Cloning and expression of the cytochrome P-450 nor2 cDNA from Cylindrocarpon tonkinense作者机构：华中师范大学生物系 筑波大学应用生物化学系
出 版 物：《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》 (生物化学与生物物理学报(英文版))
年 卷 期：1996年第28卷第5期
页 面：27-34页
核心收录：
学科分类：070903[理学-古生物学与地层学(含：古人类学)] 0709[理学-地质学] 07[理学]
主 题：细胞色素P-450nor cDNA克隆 表达
摘 要：在真菌的反硝化作用中，一种独特的细胞色素Ｐ－４５０起着一氧化氮还原酶（Ｐ－４５０ｎｏｒ）的作用。用ｇｔｌｌ构建了柱孢菌（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎｔｏｎｌｅｉｎｅｎｓｅ）ｃＤＮＡ文库。纯化的柱孢菌Ｃ。Ｐ－４５０ｎｏｒ２免疫兔，制备抗体。并用抗体筛选出阳性克隆。回收插入片段（Ｐ－４５０ｎｏｒ２ｃＤＮＡ）克隆到表达载体ｐＹＥＳ２中，并在酵母系统中表达。经Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ分析验证，表达产物能与抗体反应产生特异性杂交带。酶分析结果表明：表达产物具有一氧化氮还原酶细胞包素Ｐ－４５０ｎｏｒ２的活性，能以ＮＡＤＨ或ＮＡＤＰＨ为供体，使ＮＯ还原先成Ｎ２Ｏ。
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