核糖核酸一级结构微量分析方法的研究 Ⅲ.萤光标记法测定寡核糖核苷酸3′端及核苷酸顺序
MICRO-METHODS FOR SEQUENCING RIBONUCLEIC ACIDS Ⅲ. A FLUORESCENT METHOD FOR THE DETERMINATION OF THE 3’-END AND THE NUCLEOTIDE SEQUENCE OF AN OLIGORIBONUCLEOTIDE作者机构:中国科学院上海生物化学研究所二室 中国科学院上海生物化学研究所二室 中国科学院生物物理研究所
出 版 物:《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》 (生物化学与生物物理学报)
年 卷 期:1980年第1期
页 面:43-50页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
主 题:核昔酸 排列顺序 试剂 标记法 高碘酸 碘化合物 核糖核酸 消去反应 消除反应 萤光 微量分析 常规分析
摘 要:本文报导了一种新的萤光试剂DNS-Gly-NHNH2在寡核糖核苷酸一级结构分析中的应用。寡核糖核苷酸3′端经高碘酸氧化后能与萤光试剂DNS-Gly-NHNH2反应,经红酵母RNase酶解后得到DNS-Gly-核苷腙。通过聚酰胺薄板层析鉴定DNS-Gly-核苷腙,从而能测定寡核糖核苷酸3′端核苷。另外,运用β消去循环,对寡核糖核苷酸进行化学逐步降解,在此基础上结合上述萤光标记测定寡核糖核苷酸3′端技术,对化学合成片段UpCpCpA进行了顺序分析。片段用量为0.16A260单位。这一方法较紫外吸收法灵敏,易在一般实验室中使用。