卵巢上皮癌细胞SKOV3通过分泌外泌体促进单核巨噬细胞分化为肿瘤相关巨噬细胞的研究

作     者：应翔 吴小丽 王昕婧 朱沁怡 姜璐 吴泉锋 汪希鹏 

作者机构：同济大学附属第一妇婴保健院妇科上海200040 

出 版 物：《现代妇产科进展》 (Progress in Obstetrics and Gynecology)

年 卷 期：2015年第24卷第10期

页      面：726-729页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No:81372787) 上海市卫计委重点基金资助项目(20134033) 浦东新区重点项目(No:PW2010D-5)资助 

主　　题：外泌体 肿瘤相关巨噬细胞 卵巢肿瘤 

摘      要：目的：研究上皮性卵巢癌细胞SKOV3分泌的外泌体（exosomes）能否调控单核巨噬细胞分化为M2型肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）,并进一步参与肿瘤的转移。方法：分离SKOV3细胞外泌体,透射电镜观察形态。卵巢癌细胞外泌体、M-CSF＋IL-4和空培养基分别与人外周血CD14＋单核细胞共培养3天,观察细胞形态。结晶紫计数单核细胞贴壁率;流式细胞仪检测共培养后单核细胞CD206、HLA-DR的表达情况;ELISA法检测共培养后上清中IL-10和IL-12的含量;体外迁移实验检测肿瘤细胞迁移能力的变化。结果：透射电镜显示,外泌体近似圆形,直径30~80nm。结晶紫计数显示,外泌体共培养组和M-CSF＋IL-4组的OD值（分别为0.13±0.06,0.16±0.04）较空培养基组（0.04±0.01）增加,差异有统计学意义（P〈0.05）。倒置显微镜发现,细胞贴壁,形态类似巨噬细胞。流式结果显示,外泌体共培养组和M-CSF＋IL-4组的单核细胞CD206（分别为71.86±5.62、99.27±0.32）表达水平升高,HLA-DR（分别为12.71±7.22、3.55±0.27）表达水平降低,与空培养基组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。ELISA检测结果显示,外泌体共培养组和M-CSF＋IL-4组的上清IL-10含量（分别为71.72±0.81、82.13±2.11）增加,IL-12含量（分别为34.88±4.75、19.71±4.28）减少,与空培养基组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。体外迁移实验显示,外泌体刺激单核细胞上清组的肿瘤细胞迁移数（121.58±2.25）明显增加,分别与空培养基对照组、单核细胞上清组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：卵巢上皮癌细胞SKOV3的外泌体可诱导单核巨噬细胞分化极化为卵巢癌腹膜内TAMs表型,从而促进卵巢癌细胞的迁移能力。