口蹄疫病毒前导蛋白(L^(pro))致牛肾细胞(MDBK)作用的形态学观察
Morphological observation of Bovine Kidney(MDBK) cells effected by foot-and-mouth disease virus L^(pro)作者机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家15蹄疫参考实验室兰州730046 甘肃农业大学动物医学院兰州730070
出 版 物:《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)
年 卷 期:2009年第25卷第11期
页 面:1614-1620页
核心收录:
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:国家科技支撑计划(No.2006BAD06A14)资助~~
摘 要:为探讨口蹄疫病毒Lpro致MDBK细胞病变效应中的形态学变化,本实验在成功构建可稳定表达口蹄疫病毒Lpro目的基因的MDBK细胞系的基础上,人工诱导Lpro表达后,采用光学显微镜观察、Hoechst33258染色、AO-EB染色、DNALadder等进行检测,研究口蹄疫病毒Lpro致MDBK细胞的病变效应。结果显示,MDBK细胞系在诱导表达口蹄疫病毒Lpro24h后,光学显微镜下细胞形态表现为细胞体积缩小、核浓缩、细胞周围出现透明圈等现象;Hoechst33258染色检测呈现典型的细胞核浓缩和梅花状核碎裂;诱导表达Lpro36h后,AO-EB染色显示早期病变细胞核染亮绿色呈致密斑块或碎片状,晚期病变细胞核染橘黄色呈致密斑块;DNA凝胶电泳显示可见的DNALadder梯状条带。证明口蹄疫病毒Lpro在体外可诱导MDBK细胞发生凋亡。