家蚕B类清道夫受体BmSCRB8基因的克隆及表达

作     者：赵羽卒 张奎 唐梅 徐曼 李重阳 潘光照 申利 崔红娟 杨丽群 Yuzu Zhao Kui Zhang Mei Tang Man Xu Chongyang Li Guangzhao Pan Li Shen Hongjuan Cui Liqun Yang

作者机构：西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室重庆400716 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2016年第32卷第10期

页      面：1408-1421页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2012CB114603) 国家自然科学基金(No.81201551) 中央高校基本科研业务费专项资金(No.XDJK2013B020) 中央高校基本科研业务费专项资金学科团队项目(No.2362015XK09) 重庆市研究生科研创新项目(No.CYB2015067) 西南大学基本科研业务费专项资金(No.XDJK2015D021)资助~~ 

主　　题：家蚕 BmSCRB8 表达谱 多克隆抗体 亚细胞定位 

摘      要：B类清道夫受体在动脉粥样硬化及其他心血管疾病的形成或抑制,机体免疫防御,凋亡细胞清除等生理过程中起着重要的作用。克隆了家蚕B型清道夫受体家族的一个成员BmSCRB8基因,通过RACE技术获得BmSCRB8的c DNA全长为2 668 bp,其ORF为1 704 bp,编码567个氨基酸,通过在线预测其蛋白分子量为63.87 k Da,等电点为6.06。采用RT-PCR方法得到了BmSCRB8的时空表达谱,结果表明BmSCRB8在家蚕各组织以及血液各时期均有表达,且在脂肪体中表达量最高,变态发育时期表达量较高。原核表达获得BmSCRB8重组蛋白,并经由蛋白纯化、免疫小鼠后制备得到家蚕BmSCRB8多克隆抗体。同时构建了BmSCRB8真核表达载体并转染家蚕胚胎细胞系。免疫荧光及过表达结果显示BmSCRB8主要定位于细胞膜上,Western blotting结果显示免疫小鼠后所得到的抗血清可特异性识别BmSCRB8蛋白。