花叶型与艾叶型乌头叶片基因组DNA甲基化修饰的MSAP分析

作     者：文欢 彭成 饶朝龙 张大燕 谢晓芳 高继海 WEN Huan PENG Cheng RAO Chao-long ZHANG Da-yan XIE Xiao-fang GAO Ji-hai

作者机构：成都中医药大学药学院中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地四川成都611137 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2016年第41卷第19期

页      面：3602-3608页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(J1310034) 四川省科技支撑计划项目(2014SZ0156) 

主　　题：乌头 叶型 甲基化敏感性扩增多态性 

摘      要：建立乌头叶片DNA甲基化MSAP分析方法,并对不同形状的乌头叶片DNA甲基化修饰位点进行MSAP分析。以花叶型、艾叶型乌头不同部位叶片为实验材料,考察乌头叶片MSAP双酶切反应时间,筛选适宜的选择性扩增引物,并通过计算6%丙烯酰胺凝胶电泳图泳道和条带统计分析叶片甲基化修饰差异。结果 150 ng乌头叶片DNA MSAP双酶切反应体系在37℃条件下,酶切16 h较充分;使用25对筛选出的适宜性引物进行乌头基因组的MSAP选择性扩增,总共获得273个电泳条带,其中无甲基化或单链内甲基化228条,双链内甲基化条带27条,单链外甲基化条带18条,总甲基化率达16.48%;花叶型与艾叶型乌头总甲基化率稍有差异,分别为15.36%,14.34%,并各自获得8条、6条基因组甲基化修饰差异的核苷酸片段,占其总条带数的3.00%,2.26%。通过研究可为乌头植株的分子鉴定、良种选育与栽培,以及乌头的遗传演化等提供新思路。