高内涵分析及Western blotting法在蛋白质核质分布研究中的应用及比较研究
Comparison between different methods to detect the subcellular localization of proteins作者机构:首都医科大学2011级基础医学专业北京100069 首都医科大学基础医学院细胞生物学系肝脏保护与再生调节北京市重点实验室北京100069
出 版 物:《首都医科大学学报》 (Journal of Capital Medical University)
年 卷 期:2016年第37卷第5期
页 面:616-620页
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金:国家自然科学基金(31301154) 北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划项目(IDHT20150502)~~
主 题:高内涵分析 Western blotting 蛋白质核质分布
摘 要:目的使用不同方法对蛋白质的核质分布进行检测并比较差异。方法细胞经免疫荧光染色后使用高内涵分析(high content analysis,HCA)对蛋白质的细胞质或细胞核总荧光强度进行分析;分别提取胞质及胞核蛋白,使用Western blotting法对核质组分中的蛋白质含量进行鉴定。结果两种方法均可检测到蛋白质的出核转运;经定量分析,HCA法检测到的HuR蛋白质/核比升高倍数小于Western blotting法。结论使用HCA法检测蛋白质核质定位具有准确、客观、成本低、快捷、多参数等特点,不失为Western blotting的有效补充及替代方法。