皱纹盘鲍酶促溶性胶原蛋白的性质研究及抗体制备

作     者：游银川 麻金花 段雪昆 章骞 沈建东 刘光明 曹敏杰 YOU Yinchuan;MA Jinhua;DUAN Xuekun;ZHANG Qian;SHEN Jiandong;LIU Guangming;CAO Minjie

作者机构：集美大学食品与生物工程学院 福建省水产品深加工工程研究中心 

出 版 物：《水产学报》 (Journal of Fisheries of China)

年 卷 期：2016年第40卷第2期

页      面：267-277页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 0830[工学-环境科学与工程（可授工学、理学、农学学位）] 0908[农学-水产] 0707[理学-海洋科学] 08[工学] 083201[工学-食品科学] 0713[理学-生态学] 

基　　金：国家自然科学基金(31471640) 国家科技支撑计划(2012BAD38B09)~~ 

主　　题：皱纹盘鲍 酶促溶性胶原蛋白 圆二色谱 多克隆抗体 

摘      要：针对加工副产物鲍鱼外套膜利用率低的现象,对鲍鱼腹足和外套膜胶原蛋白相关性质进行比较研究,以期为鲍鱼的综合加工提供一定的理论依据。本研究以皱纹盘鲍为原料分别提取得到腹足酶促溶性胶原蛋白(pepsin-soluble collagen of abalone adductor,PSC1)和外套膜酶促溶性胶原蛋白(pepsin-soluble collagen of abalone mantle,PSC2),对PSC1和PSC2相关特性进行比较分析,并利用PSC1制备得到兔抗鲍鱼胶原蛋白多克隆抗体。SDS-PAGE显示,PSC1和PSC2分子组成均为(α1)3,且α1的分子量为140 ku,与水产无脊椎动物Ⅰ型胶原蛋白特征相似。对PSC1进行肽指纹图谱分析,获得6个肽段、含75个氨基酸残基,与盘鲍螺的胶原蛋白前肽α链和欧洲鲍螺的纤维状胶原一致性分别达100%和88%,证明纯化的PSC1为胶原蛋白。氨基酸组成分析表明,PSC1和PSC2的组成基本一致,但脯氨酸和羟脯氨酸含量均低于牛酸溶性胶原蛋白。圆二色谱分析结果显示,PSC1和PSC2溶液均在220和197 nm分别有一正、负峰,具有典型胶原蛋白三股螺旋结构特征。FTIR光谱分析结果提示PSC1和PSC2具有相似的三螺旋结构。利用兔抗皱纹盘鲍PSC1多克隆抗体对皱纹盘鲍、尼罗罗非鱼、鲤和仿刺参胶原蛋白进行免疫印迹分析发现,该抗体只与皱纹盘鲍PSC1和PSC2的α、β和γ链产生反应,表明该抗体具有良好的特异性。