RT-PCR检测亚马孙利什曼原虫P-4和GP-46基因表达

作     者：王华民 Soong Lynn WANG Hua-min;Soong Lynn

作者机构：海南医学院微生物学与免疫学教研室海口571101 Dept of Microbiology and ImmunologyUniversity of Texas Medical BranchGalvestonTX.USA 

出 版 物：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 (Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases)

年 卷 期：2006年第24卷第4期

页      面：266-268页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主　　题：亚马孙利什曼原虫 无鞭毛体 前鞭毛体 阶段特异性蛋白 

摘      要：目的证明亚马孙利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体的基因表达水平。方法用RNA分离试剂盒,分别提取3种不同来源的无鞭毛体(由小鼠模型皮损组织获得的无鞭毛体、由前鞭毛体培养转化而来的无鞭毛体,以及来自J774.G8巨噬细胞株的无鞭毛体)的总RNA,以及前鞭毛体总RNA,然后用SuperScripⅡ逆转录聚合酶将其逆转录为cD-NA,再经PCR扩增无鞭毛体特异核酸酶(P-4)和前鞭毛体特异膜糖蛋白(GP-46)的特异片段,经1.5%琼脂糖凝胶电泳分析。结果3种不同来源的无鞭毛体均观察到P-4特异性条带(273bp),且密度相似,但在前鞭毛体中未观察到;在前鞭毛体中观察到高表达的GP-46特异性条带(325bp),但在3种无鞭毛体中弱表达。结论由前鞭毛体转化的无鞭毛体能高水平表达亚马孙利什曼原虫无鞭毛体P-4特异基因,可为其生物化学及免疫学研究提供无鞭毛体来源。