GATA-1对高原红细胞增多症模型大鼠骨髓CD71^+细胞EpoR表达的影响

作     者：刘芳 丁瑾 魏巍 冯婷婷 陈英 冀林华 韩园芳 LIU Fang;DING Jin;WEI Wei;FENG Ting-Ting;CHEN Yin;JI Lin-Hua;HAN Yuan-Fang

作者机构：青海大学医学院生物化学教研室青海西宁810000 青海大学附属医院血液科青海西宁810000 

出 版 物：《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期：2016年第24卷第3期

页      面：884-891页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81441116) 青海省科技厅(应用)基础研究计划项目(No.2012-Z-729) 青海大学"123高层次人才培养工程"-中青年学术带头人基金 青海大学医学院中青年科研基金团队项目(2014-KT-1) 

主　　题：高原红细胞增多症 GATA-1 促红细胞生成素受体 shRNA 

摘      要：目的:探讨GATA-1对高原红细胞增多症(high altitude polycythemia,HAPC)模型大鼠骨髓CD71+细胞促红细胞生成素受体(EpoR)表达的影响。方法:选用雄性SD大鼠48只,随机分为对照和HAPC模型2组。在海拔4 300米自然环境下复制HAPC模型并采用骨髓细胞分类计数和血液学参数检测进行验证。应用密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合的方法分选大鼠骨髓CD71+细胞后,应用流式细胞术和细胞免疫荧光观察其EpoR的细胞表面表达水平,Q-PCR和Western blot检测其GATA-1、EpoR mRNA和蛋白的表达变化。分别在常氧和低氧下培养CD71+细胞,筛选最佳干扰序列GATA-1 shRNA1后,转染96 h,Q-PCR和Western blot检测GATA-1、EpoR mRNA和蛋白的表达水平。结果:血液学参数和骨髓细胞分类计数结果显示,HAPC大鼠模型复制成功。与对照组比较,HAPC模型组骨髓CD71+细胞膜表面EpoR的表达增高(P0.05),GATA-1、EpoR mRNA和蛋白的表达也明显增高(P0.05)。相关性分析显示,两组GATA-1、EpoR mRNA和蛋白的表达均呈正相关(对照组,r=0.929,P0.01,r=0.802,P0.05;HAPC模型组,r=0.822,P0.05,r=0.839,P0.01)。GATA-1 shRNA1干扰两组骨髓CD71+细胞96 h后,EpoR mRNA和蛋白的表达低于阴性对照组(P0.05),且在低氧条件下GATA-1和EpoR的表达仍高于相应的常氧状态。结论:GATA-1对EpoR表达的影响可能与HAPC的发生发展相关联。