利用无标记的分子信标及核酸染料Hoechst 33258检测特定序列核酸

作     者：向东山 翟琨 向文军 王联芝 XIANG Dong-Shan;ZHAI Kun;XIANG Wen-Jun;WANG Lian-Zhi

作者机构：湖北民族学院生物资源保护与利用湖北省重点实验室 湖北民族学院化学与环境工程学院 四川文理学院化学化工学院 

出 版 物：《分析化学》 (Chinese Journal of Analytical Chemistry)

年 卷 期：2014年第42卷第8期

页      面：1210-1214页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学] 

基　　金：湖北省教育厅重点项目(Nos.D20131905,D20131906) 国家自然科学基金项目(No.21267009) 生物资源保护与利用湖北省重点实验室开放基金(No.PKLHB1316) 湖北民族学院团队项目(No.MY2013T003) 湖北省林学一级学科资助~~ 

主　　题：无标记分子信标 Hoechst 33258 单链核酸 荧光 

摘      要：利用无标记的分子信标及核酸染料Hoechst 33258建立了一种高灵敏、高选择性的特定序列核酸检测方法,并以野生型乙型肝炎病毒的一段寡核苷酸序列为目标DNA,对这种方法进行了验证。在此体系中,分子信标的茎完全设计成C/G碱基对。在没有目标DNA时,Hoechst 33258与分子信标作用较弱,其荧光信号很弱;当有目标DNA存在时,分子信标与目标DNA杂交形成双链,Hoechst 33258与双链DNA作用后荧光信号显著增强。在优化条件下,目标DNA浓度在2×10-10;×10-8mol/L范围内时,Hoechst 33258的荧光强度（ΔI）与目标DNA的浓度（C）之间具有良好的线性关系,回归方程为ΔI=3.3439C+18.6949（R2=0.9982）,方法检出限（3σ）为9×10-11mol/L。此方法操作简单、检测速度快、灵敏度高、重现性好、检出限低。