重组人内皮抑素对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的影响

作     者：宋立文 王洪林 刘波 Song Liwen;Wang Honglin;Liu Bo

作者机构：重庆医科大学附属第一医院肝胆外科重庆400016 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2011年第33卷第23期

页      面：2490-2494页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主　　题：重组人血管内皮抑素 增殖及凋亡 Wnt信号通路 人肝癌细胞SMMC-7721 

摘      要：目的初步研究Wnt通路在重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,ES)诱导人肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡过程中的作用及可能机制。方法分别以50、100、200、400μg/ml ES体外处理人肝癌细胞株SMMC-7721,利用MTT比色法检测不同浓度、时间ES作用下的细胞增殖状态;利用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;Western blot检测β连环蛋白(β-catenin)、糖原合酶激酶3β(GSK-3β)表达;应用RT-PCR检测Wnt信号通路下游基因survivin及cyclin D1 mRNA表达情况。结果不同浓度的ES对人肝癌细胞SMMC-7721具有不同程度的生长抑制作用,且存在时间剂量效应,ES作用48 h和72 h后,SMCC-7721细胞抑制率分别为(10.45±0.73)%和(21.81±0.55)%(50μg/ml);(15.42±1.91)%和(27.81±0.92)%(100μg/ml);(23.64±0.43)%和(31.07±0.13)%(200μg/ml);(28.88±0.63)%和(43.76±0.55)%(400μg/ml)。与24 h各浓度组相比差异有统计学意义(P=0.000)。各浓度ES处理后,SMMC-7721细胞G1期细胞比例与对照组比较差异有统计学意义(P=0.00);SMMC-7721细胞经ES作用72 h后,随ES浓度升高,细胞凋亡率增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P0.05)。ES能显著降低细胞β-catenin蛋白表达(P=0.000),但对GSK-3β蛋白表达无明显影响。ES能下调Wnt信号通路下游转录因子survivin及cyclin D1 mRNA水平。结论 ES通过促进β-catenin蛋白降解,降低Wnt信号通路下游癌基因survivin及cyclin D1 mRNA的转录,从而抑制SMMC-7721细胞增殖,并诱导细胞凋亡。ES抑制增殖、诱导凋亡的作用与GSK-3β蛋白表达无关。