EHEC O157：H7志贺毒素Ⅱ型A、B亚单位的表达及功能鉴定

作     者：焦永军 郭喜玲 史智扬 曾晓燕 朱进 孙慧 万佳艺 汪华 JIAO Yong-jun;GUO Xi-ling;SHI Zhi-yang;ZENG Xiao-yan;ZHU Jin;SUN Hui;WAN Jia-yi;WANG Hua

作者机构：江苏省疾病预防控制中心卫生部肠道病原微生物重点实验室南京210009 南京军区军事医学研究所 南京医科大学 卫生部抗体技术重点实验室 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2008年第28卷第1期

页      面：20-23页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：江苏省自然科学基金(BK2006242) 

主　　题：肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 志贺毒素Ⅱ型A B亚单位 功能鉴定 

摘      要：目的克隆、表达肠出血性大肠杆菌（enterohemorrhagic Escherichia coli，EHEC）O157：H7志贺毒素（Shigatoxin，Stx）Ⅱ型A、B亚单位，并鉴定其免疫学功能。方法从EHECO157：H7基因组中克隆编码StxⅡ型A、B亚单位的基因，经测序、酶切后，导人表达载体pGEX-4T-2，转化大肠杆菌Top10F′，经诱导、纯化得到谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase，GST）-A和GST-B融合蛋白。分别用A、B亚单位融合蛋白免疫BALB／c小鼠获得高免血清，观察A、B亚单位血清对小鼠进行毒素攻击的保护作用。结果StxⅡ型A、B亚单位的GST融合蛋白获得高效表达并纯化；A、B亚单位的高免血清可以保护小鼠对致死量毒素的攻击。结论StxⅡ型A、B亚单位蛋白可以作为EHECO157：H7疫苗的候选分子，同时针对A、B亚单位蛋白的中和单抗可以对易感人群起到紧急保护作用。