牛传染性鼻气管炎病毒重组gE蛋白间接ELISA诊断方法的建立

作     者：王海燕 朱远茂 薛飞 童光志 赵立平 相文华 韩文瑜 WANG Hai-yan;ZHU Yuan-mao;XUE Fei;TONG Guang-zhi;ZHAO Li-ping;XIANG Wen-hua;HAN Wen-yu

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 吉林大学农学部长春130062 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2005年第25卷第12期

页      面：29-33页

核心收录：

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家"863"计划资助项目(2003AA241110) 黑龙江省科技攻关计划资助项目(GA02B501) 

主　　题：牛传染性鼻气管炎 牛疱疹病毒Ⅰ型 糖蛋白gE 酶联免疫吸附试验 

摘      要：以重组牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白,经纯化后作为诊断抗原建立了检测牛血清特异性gE抗体的间接酶联免疫吸附试验,确定其最佳包被量为每孔1.075μg。样品稀释度为1:40,兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1∶5000。判定标准为样品OD值大于0.582为阳性,小于0.472为阴性,在0.472与0.582之间为可疑。经抗特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。在403份血清样品中,进口试剂盒检出234份阳性样品,该诊断方法检出248阳性样品,与进口试剂盒的符合率为94.3%,但该诊断方法检出率更高。在43份血清样品中,中和试验检出24份阳性样品,该诊断方法检出28份阳性样品,与中和试验的符合率为85.7%。应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染率,发现这些地区的IBRV感染率为68.7%。